定点突变提高极端嗜热α-淀粉酶ApkA的高温活性和热稳定性

• 作者: 曾静 袁林 郭建军
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 极端嗜热α-淀粉酶 离子键 定点突变 高温活性 热稳定性
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 20-26
• 页数: 7页
• 分类号: Q814
• 字数: 6225字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201702004

摘要

极端嗜热α-淀粉酶具有优良的高温活性和热稳定性,因此在淀粉液化工艺中具有巨大的应用潜力,并且其高温适应性机制研究可以为构建耐高温6c-淀粉酶提供理论依据和设计思路.通过分析来源于极端嗜热古生菌Thermococcus kodakarensis KOD1的α-淀粉酶ApkA的氨基酸序列,构建缺失信号肽突变体ApkAds和单点突变体ApkAdsA 180K.酶学性质分析表明,与ApkAds相比,突变体ApkAdsA 180K的高温活性和热稳定性明显提高.其中ApkAds的最适反应温度为90℃,对应的酶比活力为2 946.75 U/mg;突变体ApkAdsA 180K的最适反应温度为100℃,对应的酶比活力为4 501.08 U/mg.ApkAds于90℃的半衰期约为5h,突变体ApkAdsA 180K于90℃的半衰期约为7h.通过同源模建得到的蛋白质三级结构显示,突变体ApkAdsA 180K中氨基酸残基K180与D212间形成离子键.本研究结果表明ApkAdsA 180K中K180与D212间离子键有利于其维持其高温活性和热稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭建军	江西省科学院微生物研究所	51	113	5.0	8.0
2	袁林	江西省科学院微生物研究所	36	59	4.0	5.0
3	曾静	江西省科学院微生物研究所	28	46	3.0	5.0