AAPH引起小鼠早期胚胎发育阻滞中线粒体相关机能研究

• 作者: 于海泉 刘瑞花 岳永莉 张祥 李向南
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 线粒体膜电位 mtDNA拷贝数 小鼠胚胎2细胞阻滞活性氧
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 11-20
• 分类号: S185
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2017.01.002

摘要

哺乳动物胚胎体外培养体系影响着早期胚胎的发育潜能,在目前模拟体内输卵管及子宫的低氧环境的培养系统中,活性氧(reactive oxygen species,ROS)被认为是影响胚胎发育的一个重要因素.本实验探究了ROS在小鼠(Mus musculus)体外发育2细胞阻滞胚胎中对线粒体相关机能的影响.本研究使用2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(2,2'-Azobis (2-methylpropionamidine) dihydrochloride,AAPH)处理昆明白小鼠体外受精卵,通过荧光探针检测处理前后与线粒体活性相关的线粒体膜电位、线粒体ROS(mtROS)及线粒体分布状态的变化,并利用qRT-PCR检测ROS相关基因、线粒体转录因子A(mitochondrialtranscription factorA,TFAM) mRNA的表达量及mtDNA的拷贝数.研究结果显示,使用1.0 mmol/L浓度的AAPH分别处理的胚胎,具有较高的阻滞率(66.16％)和较低的损伤率(24 h畸形率9.09％,48 h死亡率10.39％),ROS染色实验结果显示,AAPH处理能够使胚胎内胞质ROS水平明显升高,所检测的ROS相关基因mRNA表达量升高.1.0 mmol/L处理后二细胞期胚胎线粒体膜电位及mtROS水平明显高于对照组,mtDNA的拷贝数增加,qRT-PCR结果显示,处理组TFAM基因的表达量明显高于对照组.以上研究表明,AAPH处理引起的氧化应激反应及发育阻滞的胚胎中,线粒体活性升高,线粒体数目增加,线粒体转录因子A表达增强,表明线粒体参与调节细胞内ROS的动态平衡.本研究初步探究了ROS与线粒体相关功能变化的关系,为揭示卵母细胞成熟机制和优化哺乳动物胚胎体外培养体系提供了参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳永莉	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	10	21	3.0	4.0
2	于海泉	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	21	34	4.0	5.0
3	张祥	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	3	4	1.0	2.0
4	刘瑞花	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	2	4	1.0	2.0
5	李向南	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	2	4	1.0	2.0