重组产气荚膜梭菌plc毒素基因植物乳酸杆菌的构建

• 作者: 冯万宇 周庆民 宁秀云 张艳 徐馨 李兰兰 李广兴 王新 郑晓星 黄健
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 产气荚膜梭菌 plc基因 植物乳酸杆菌 表达
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 31-34,37
• 页数: 5页
• 分类号: S858.31
• 语种: 中文

摘要

依据乳酸菌的肠道益生作用,选择产气荚膜梭菌关键致病因子α毒素/磷脂酶C为抗原,构建产气荚膜梭菌α毒素去除信号肽的plc基因片段重组植物乳杆菌,利用植物乳酸菌穿梭载体pSIP409构建重组质粒pSIP409-plc,经双酶切鉴定和序列测定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并进行SpplP诱导表达.Western Blot证明重组蛋白表达成功,并且主要以包涵体形式存在,plc重组蛋白相对分子质量分别为40 kDa.重组质粒pSIP409-plc分别电转化植物乳杆菌NC8细胞,PCR和双酶切鉴定正确后进行SpplP诱导表达.Western Blot和间接免疫荧光鉴定表明,构建的重组植物乳酸杆菌具有诱导分泌plc蛋白的能力,可作为黏膜免疫的候选抗原.