藏猪β-防御素2基因克隆及原核表达载体的构建

• 作者: 周尧 张立平 潘康成 王振华 谷笑笑
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 藏猪 β-防御素2 克隆 原核表达载体
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 848-853
• 页数: 6页
• 分类号: S858.28
• 字数: 5051字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2017.04.019

摘要

为了构建藏猪β-防御素2(pBD-2)成熟肽原核表达载体,从藏猪肝组织中提取总RNA,通过RT-PCR获取pBD-2目的基因,并与pMD19-T载体连接构建重组质粒,命名为pMD19T-pBD-2;以pMD19T-pBD-2质粒为模板,克隆pBD-2成熟肽cDNA序列并构建成熟肽pET-32a-pBD-2表达质粒.结果显示,藏猪pBD-2基因全长为298 bp,与野猪和家猪的pBD-2基因同源性分别达100.0％和98.9％;藏猪pBD-2基因具有1个完整的开放阅读框,编码69个氨基酸组成的多肽,包含21个氨基酸残基的信号肽、11个氨基酸残基的前导肽和37个氨基酸残基的成熟肽;编码的pBD-2成熟肽稳定性较好,分子量4085.78,等电点8.89,具有6个半胱氨酸(Cys)残基,7个带正电荷和2个带负电荷的氨基酸残基,为亲脂性和亲水性多肽;从pMD19T-pBD-2质粒中亚克隆得到长度为114 bp藏猪pBD-2成熟肽cDNA序列,菌落PCR、酶切和测序鉴定证明成功构建了成熟肽pET-32a-pBD-2原核表达质粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘康成	四川农业大学动物医学院动物微生态研究中心	107	1576	23.0	36.0
2	王振华		18	109	5.0	10.0
3	谷笑笑	四川农业大学动物医学院动物微生态研究中心	6	19	3.0	4.0
4	张立平		1	2	1.0	1.0
5	周尧		1	2	1.0	1.0