梅花鹿骨钙素的原核表达与活性研究

• 作者: 张楠楠 张鹏飞 曲毅 李宏灵 李帅军 赵雨
• 来源期刊: 吉林中医药
• 学科: 医学
• 关键词: 梅花鹿 骨钙素 原核表达 鹿茸软骨细胞
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 62-66
• 页数: 5页
• 分类号: R282.74
• 字数: 3136字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13463/j.cnki.jlzyy.2017.01.025

摘要

目的 利用基因工程技术表达纯化梅花鹿骨钙素重组蛋白(Bone gla protein,BGP)并初步研究其活性,为研究梅花鹿茸生长发育提供技术支撑.方法 通过PCR技术获取BGP基因,构建pGEX-BGP-His表达载体,并转化至Rosseta(DE3)宿主菌中,IPTG诱导表达.经Ni Sephrose 6 Fast Flow分离纯化,SDS-PAGE鉴定纯化产物.MTT法分析BGP对鹿茸软骨细胞chon-sv40的生物活性.结果 经双酶切、测序证实pGEX-BGP-His表达载体构建成功;成功诱导表达相对分子量33.5 KDa的重组蛋白;以37℃,0.1 mmol/L IPTG诱导5h条件下重组蛋白表达量较高;蛋白纯化后纯度可达95％;重组蛋白对鹿茸软骨细胞chon-sv40具有明显促增殖作用.结论 骨钙素与鹿茸软骨细胞chon-sv40的增殖密切相关,为后续BGP在骨代谢机制以及鹿茸有效成分的研究奠定基础,对鹿茸生长机制的研究具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵雨	长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心	137	528	12.0	17.0
2	张鹏飞	长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心	11	11	2.0	2.0
3	曲毅	长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心	10	44	4.0	6.0
7	张楠楠	长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心	8	7	2.0	2.0
8	李帅军	长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心	4	6	1.0	2.0
9	李宏灵	长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心	3	3	1.0	1.0