人BRE1B基因对眼B16黑色素瘤细胞生长的影响

• 作者: 刘丹 刘园园 刘莹 叶棋浓 徐小洁 朱晓雨 李玲
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 人BRE1B基因 克隆 真核表达 眼B16黑色素瘤细胞
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1101-1104
• 页数: 4页
• 分类号: R739.7
• 字数: 3604字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13389/j.cnki.rao.2017.0278

摘要

目的 构建人BRE1B基因真核表达载体,并初步探讨该基因对眼B16黑色素瘤细胞生长的影响.方法 将传代培养的眼B16黑色素瘤细胞随机分为实验组(转染pCMV-Tag-2B-BRE1B重组质粒)和对照组(转染pCMV质粒).以乳腺癌文库为模板应用PCR技术扩增出人BRE1B基因的CDS编码区序列,构建pCMV-Tag-2B-BRE1B重组质粒,将pCMV-Tag-2B-BRE1B重组质粒和pCMV质粒瞬时转染眼B16黑色素瘤细胞后,应用Western blot法检测BRE1B蛋白的表达,应用CCK8法和克隆形成法检测该重组质粒对眼B16黑色素瘤细胞生长的影响.结果 PCR技术扩增出人BRE1B基因CDS编码区序列,且条带与预期大小一致;与对照组相比,茵液PCR鉴定结果为阳性,双酶切的条带长度分别为大约4000 bp和3050 bp,测序鉴定人BRE1B基因的编码序列与插入的DNA序列完全一致;Western blot结果表明pCMV-Tag-2B-BRE1B重组质粒在实验组眼B16黑色素瘤细胞成功表达,对照组则未检测到特异条带;CCK8法和克隆形成法结果表明pCMV-Tag-2B-BRE1B重组质粒能够抑制眼B16黑色素瘤细胞的生长.结论 本研究成功构建了带有pCMV-Tag-2B标签的人BRE1B基因真核表达载体,并发现该基因抑制眼B16黑色素瘤细胞的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘园园		3	2	1.0	1.0
2	朱晓雨		3	4	2.0	2.0
3	刘莹		9	2	1.0	1.0
4	徐小洁		2	2	1.0	1.0
5	李玲		2	2	1.0	1.0
6	叶棋浓		2	2	1.0	1.0
7	刘丹		9	35	4.0	5.0