肿瘤相关成纤维细胞通过分泌基质细胞衍生因子1调节肺癌A549细胞的化疗耐药性

• 作者: 周外民 宋现运 张志华 张玉妥 张秀珑 温翠玲 赵建清 邹芳
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 关键词: 肺肿瘤 肿瘤微环境 肿瘤相关成纤维细胞 基质细胞衍生因子1 Bcl-xL 耐药性
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 339-343
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2017.05.004

摘要

目的 探讨肿瘤相关成纤维细胞(CAF)是否通过分泌基质细胞衍生因子1(SDF-1)调节肺癌A549细胞的化疗耐药性.方法 采用原代细胞分离方法获得肺癌患者的 CAF,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测A549细胞的增殖能力和对化疗药物的耐药性,荧光定量PCR检测Bcl-xL mRNA水平,Western blot检测Bcl-xL蛋白水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CAF分泌SDF-1的情况.结果 CAF可以促进肺癌A549细胞的增殖,而正常纤维细胞对A549细胞增殖的影响不明显.培养72 h后,A549+CAF上清组和A549+NF上清组的吸光度(A)值分别为0.814±0.006和0.753±0.006,差异有统计学意义(P<0.05).荧光定量PCR检测结果显示,A549组、A549+NF上清组和A549+CAF上清组的Bcl-xL mRNA表达水平分别为1.00±0.11、1.10±0.09和3.50±0.30,A549+CAF上清组与A549+NF上清组比较,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot检测显示,A549组、A549+NF上清组和A549+CAF上清组的Bcl-xL 蛋白表达水平分别为1.00±0.08、1.10±0.12和3.10±0.25,A549+CAF上清组与A549+NF上清组比较,差异有统计学意义(P<0.05).ELISA检测显示,A549+NF上清组和A549+CAF上清组中SDF-1含量分别为3.23±0.02和9.53±0.10,差异有统计学意义(P<0.05).MTT检测显示,A549组、A549+AMD3100组、A549+NF上清组、A549+NF上清+AMD3100组、A549+CAF上清组和A549+CAF上清+AMD3100组的A值分别为0.43±0.03、0.25±0.02、0.48±0.03、0.31±0.03、0.72±0.06和0.45±0.03,A549+CAF上清和A549+NF上清组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 CAF通过分泌SDF-1激活肺癌A549细胞中的趋化因子受体4(CXCR4),提高Bcl-xL的表达,增强肺癌A549细胞对顺铂的化疗耐药性,这为 CAF作为肺癌潜在的治疗靶点提供了实验依据.