摘要:
背景:碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)可促进牙周膜成纤维细胞的有丝分裂和趋化,有利于细胞外基质及牙周膜新生血管网的生成,但其易降解、半衰期短,单独局部应用代谢迅速.目的:探讨bFGF/壳聚糖/聚乳酸复合支架对牙周膜细胞生长和增殖的影响.方法:采用冷冻干燥法制备不同比例(聚乳酸与壳聚糖的质量比分别为4:1、3:2、1:1、2:3、1:4)的壳聚糖/聚乳酸复合支架,以孔隙率、力学强度筛选最优配比的复合支架,用于制备含0,0.1,1,10,100μg/L bFGF的壳聚糖/聚乳酸支架.①细胞毒性实验:分别以含0,0.1,1,10,100μg/L bFGF的壳聚糖/聚乳酸支架浸提液(实验组)及DMEM培养液(空白对照组)培养大鼠牙周膜细胞,24,48,72 h后,MTT法检测细胞增殖;培养5 d后,流式细胞仪检测细胞周期;②细胞相容性实验:将含0.1,1,10,100μg/L bFGF的壳聚糖/聚乳酸支架分别与大鼠牙周膜细胞共培养,1,3,5,7 d后进行细胞计数;培养3 d后,扫描电镜观察细胞生长情况.结果与结论:①从孔隙率、力学强度指标综合考虑,聚乳酸与壳聚糖的最佳质量比为2:3;②随着培养时间的延长,各组细胞增殖A值逐渐增加;培养48,72 h时,1,10,100μg/L实验组细胞增殖A值高于空白对照组(P<0.05),且10μg/L实验组细胞增殖A值最高(P<0.05);③0.1,1,10,100μg/L实验组G0/G1期细胞百分比低于空白对照组(P<0.05),以10μg/L实验组最低;0.1,1,10,100μg/L实验组S期、G2/M+S期细胞比例均高于空白对照组(P<0.05),以10μg/L实验组最高(P<0.05);④随着培养时间的延长,各组细胞计数逐渐增多;培养3,5 d时,10μg/L实验组细胞计数高于其余各组(P<0.05).培养3 d后,大鼠牙周膜细胞在10μg/L实验组支架上黏附生长,状态良好;⑤结果表明,bFGF/壳聚糖/聚乳酸复合支架可促进牙周膜细胞的增殖.