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摘要:
为了有效地提高β-葡萄糖苷酶的活性,本实验将多粘类芽孢杆菌(Bacilluspolymyxa)β-葡萄糖苷酶bglA、bglB和bgl(bglA和bglB基因)基因分别连接在pET-28a上并在大肠杆菌C41中表达.将这3株重组菌分别命名为EA、EB及共表达菌株EAB,并将构建好的工程菌EA和EB按1:1,1:2,2:1进行混合培养,分别比较单一酶组分、共表达及混合表达菌株的酶活.SDS-PAGE电泳图显示BglA和BglB的大小都为50 ku,EA和EB混合培养的蛋白大小也为50 ku,Bgl大小为100 ku,表明BglA和BglB在体外不能形成蛋白复合物,只有在生物体内才能形成Bgl复合蛋白.酶活测定结果表明共表达Bgl与多粘类芽孢杆菌的酶活差异不显著,但显著高于其他组分酶活(P<0.05).刚果红染色结果也表明Bgl酶活比单一酶组分的酶活明显提高.本实验为纤维素酶多组分人工组装及集成生物工艺菌种的构建奠定实验基础.
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类芽孢杆菌属
大肠杆菌
可溶性表达
表达载体
乳糖诱导大肠杆菌β-D-半乳糖苷酶试验
乳糖
诱导
大肠杆菌
B-D-半乳糖苷酶
内容分析
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文献信息
篇名 多粘类芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶bglA、bglB和 bgl基因在大肠杆菌中的表达
来源期刊 草业学报 学科
关键词 β-葡萄糖苷酶 多粘类芽孢杆菌 克隆和表达 共表达 酶活
年,卷(期) 2017,(5) 所属期刊栏目 研究论文
研究方向 页码范围 189-196
页数 8页 分类号
字数 6377字 语种 中文
DOI 10.11686/cyxb2016220
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 吴润 甘肃农业大学动物医学学院 108 576 13.0 19.0
2 王艳 甘肃农业大学动物医学学院 8 15 2.0 3.0
3 王川 甘肃农业大学动物医学学院 17 45 3.0 6.0
4 万学瑞 甘肃农业大学动物医学学院 26 90 4.0 9.0
5 刘桂林 甘肃农业大学动物医学学院 4 2 1.0 1.0
6 刘原子 甘肃农业大学动物医学学院 3 4 1.0 1.0
7 吴自祥 甘肃农业大学动物医学学院 3 4 1.0 1.0
8 马亚茹 甘肃农业大学动物医学学院 1 1 1.0 1.0
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β-葡萄糖苷酶
多粘类芽孢杆菌
克隆和表达
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草业学报
月刊
1004-5759
62-1105/S
大16开
兰州市嘉峪关西路768号(兰州市61号信箱)
54-84
1990
chi
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7
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81391
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