静电纺丝石墨烯/丝素蛋白纳米膜的构建及体外生物相容性研究

• 作者: 杨宇民 牛长梅 王鸿博 赵亚红 龚佳欢
• 来源期刊: 中国修复重建外科杂志
• 关键词: 静电纺丝 石墨烯 丝素蛋白 纳米膜 导电性 雪旺细胞
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 干细胞与组织工程
• 页码范围: 1119-1126
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7507/1002-1892.201703046

摘要

目的 探索以石墨烯(graphene,Gr)和丝素蛋白(silk fibroin,SF)为原料,采用静电纺丝技术制备Gr-SF纳米膜方法,并评价Gr-SF纳米膜体外生物相容性.方法 取Gr和SF溶于甲酸溶液,按照不同Gr质量分数(0、5％、10％、15％、20％)配制静电纺丝溶液,测定溶液静态接触角.采用静电纺丝技术制备0、5％、10％、15％、20％ Gr-SF纳米膜(分别为A、B、C、D、E组),光镜和扫描电镜观察其结构,电化学工作站循环伏安法测定电导率,正己烷溶液置换法测定孔隙率,采用L929细胞以细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法评价细胞毒性.取原代培养的SD大鼠雪旺细胞与各组Gr-SF纳米膜共培养3d,甲苯胺蓝染色观察雪旺细胞生长形态和分布,CCK-8法检测细胞黏附情况,EdU/Hoechst33342染色检测细胞增殖情况.结果 静态接触角检测显示随Gr质量分数增大,Gr-SF静电纺丝溶液亲水性降低.光镜和扫描电镜观察示Gr-SF纳米膜具有纳米纤维结构,Gr颗粒分散在纳米膜中,Gr质量分数增加会促使颗粒聚集.孔隙率检测示Gr-SF纳米膜均具有高孔隙率(＞65％),随Gr质量分数增加,Gr-SF纳米膜的孔隙率和电导率均逐渐增加,C、D、E组均高于A组(P＜0.05).体外L929细胞毒性检测显示Gr-SF纳米膜具有良好生物相容性.甲苯胺蓝染色、CCK-8检测及EdU/Hoechst33342染色示,Gr质量分数在10％以内的Gr-SF纳米膜可支持共培养的雪旺细胞成活和增殖.结论 采用静电纺丝技术制备的10％Gr-SF纳米膜具有合适的亲水性、导电性、孔隙率等理化特性,同时具有良好的体外生物相容性,可用于组织工程神经制备.