补骨脂水煎液和醇提物对斑马鱼骨骼发育的影响及其毒性作用

• 作者: 宋捷 景莉君 王茉 詹扬 贾晓斌 陈书芹 陈颖 韦英杰
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 斑马鱼 补骨脂 骨骼发育
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 中国毒理学会中青年学者科技论坛
• 页码范围: 661-669
• 页数: 9页
• 分类号: R285.1
• 字数: 3735字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2017.06.024

摘要

目的 研究补骨脂水煎液(WD)和醇提物(EE)促骨骼发育与安全性的差异.方法 将受精后3d(3 dpf)斑马鱼幼鱼暴露于泼尼松龙(PN)25μmol·L-1和WD或EE 0.1,1,10和100 mg生药·L-1,以及依替膦酸二钠(ED)30 mg·L-1溶液中,隔天换液至9 dpf处死.茜素红染色光学显微镜观察斑马鱼头骨骨矿化面积和骨密度,荧光定量PCR法检测9 dpf斑马鱼骨保护素(OPG)和NF-κB受体活化因子配体(RANKL)mRNA表达.另将1 dpf斑马鱼胚胎置于EE 10,20,30,35,40,50和60 mg生药·L-1、WD 10,50,100,125,150,175,200和500 mg生药·L-1、补骨脂素(PS)12.5,25,50,100,200和400μmol·L-1及补骨脂酚(BK)1,5,10,25和50 μmol·L-1溶液中,光镜检测3 dpf斑马鱼胚胎形态,观察记录给药后2～9 dpf胚胎或幼鱼死亡数,SPSS软件计算4,6和9 dpf LC50;另用速率法检测6 dpf斑马幼鱼谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性.结果 与模型组相比,EE 0.1 mg生药·L-1和WD 1 mg生药·L-1能显著增加斑马鱼头部骨骼染色面积和骨密度(P＜0.01),提示增加骨矿化量;且WD和EE1 mg生药·L-1均上调OPG mRNA、下调RANKLmRNA表达水平(P＜0.01),OPG/RANKL比值显著提高(P＜0.01).EE,WD,PS和BK可致斑马鱼心包、卵黄囊肿大,GOT活性降低(P＜0.01),WD和PS的LCso值分别为EE和BK的4～7倍和4.3～20倍.结论 EE较WD促骨骼发育活性强,且毒性更大,提示脂溶性特征性成分可能是起效或致毒的关键成分.