抑癌基因DKK3对皮肤恶性黑素瘤细胞增殖和凋亡的影响

• 作者: 余音 刁庆春 刘林红 刘素桃 李晶 王开振 肖亮 黎智
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 黑色素瘤 细胞增殖 细胞凋亡 DKK3 抑癌基因
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 904-908
• 页数: 5页
• 字数: 3630字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2017.12.010

摘要

目的 探讨DKK3在人皮肤恶性黑素瘤细胞及组织中的表达及其对黑素瘤细胞A375增殖与凋亡的影响.方法 通过反转录(RT)-PCR及实时定量PCR分析DKK3mRNA在人恶性黑素瘤细胞系HM、A375、WM451、WM35、SK-MEL-1、Hs-695T和MDA-MB-435s及38例原发性黑素瘤、4例转移性黑素瘤和20例色素痣组织中的相对表达.分别转染恶性黑素瘤A375细胞pcDNA3.1(+)-Flag-DKK3质粒(实验组)和pcDNA3.1(+)-Flag-Vector质粒(对照组),RT-PCR验证DKK3的过表达;通过CCK8法和平板克隆实验分析DKK3对A375细胞增殖的影响,流式细胞仪分析DKK3对A375细胞凋亡的影响,Western印迹检测A375细胞周期和凋亡相关蛋白的表达.结果 DKK3 mRNA在WM35细胞系表达下调,HM、A375、WM451、SK-MEL-1和Hs-695T细胞系表达缺失,MDA-MB-435s细胞高表达.与色素痣相比,DKK3mRNA在人恶性黑素瘤组织表达降低(P＜ 0.001).与对照组A375细胞相比(100％),实验组A375细胞克隆形成效率明显受到抑制(23.22％±3.55％);同时转染后24、48、72 h细胞活性受到明显抑制(均P＜ 0.05).流式细胞仪检测发现,与对照组A375细胞(G1期,25.38％±2.92％)相比,实验组A375细胞明显阻滞于G1期(48.68％±3.92％,P＜0.001),细胞凋亡率明显升高(P＜ 0.001).与对照组A375细胞相比,实验组周期凋亡相关蛋白p21、Bax、活化的parp和活化的Caspase-3表达升高,细胞周期蛋白D1和Bcl2表达降低(均P＜0.001).结论 DKK3在人皮肤恶性黑素瘤组织中表达下调,可能作为潜在的抑癌基因参与皮肤恶性黑素瘤的进展.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刁庆春	重庆市中医院皮肤科	39	103	5.0	9.0
2	余音	重庆市中医院皮肤科	7	3	1.0	1.0
3	王开振	重庆市中医院肾病科	4	10	2.0	3.0
4	肖亮	湖北省十堰市人民医院骨科	5	12	2.0	3.0
5	刘素桃	重庆市中医院皮肤科	5	3	1.0	1.0
6	李晶	重庆市中医院皮肤科	2	3	1.0	1.0
7	刘林红	重庆市中医院皮肤科	1	3	1.0	1.0
8	黎智	重庆市中医院皮肤科	2	3	1.0	1.0