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摘要:
目的 构建沉默Nrf2(Nuclear Factor-erythroid 2-related Factor 2,Nrf2)基因表达的RNA干扰质粒,建立稳定转染Nrf2干扰质粒的人支气管上皮细胞株BEAS-2B (Human Bronchial Cells),并对其在该细胞中的沉默效果进行鉴定.方法 根据Genbank上公布的人Nrf2核苷酸序列设计4条RNA抑制靶序列.化学合成后载入PGU6/RFP/Neo质粒载体构建成短发夹RNA (shRNA)表达载体,分别转染至BEAS-2B细胞,G418筛选稳定转染细胞株,RT-PCR(Real time-RCR)检测目标基因Nrf2的表达水平.结果 成功构建shRNA质粒表达载体,G418浓度为400mg/L时能够筛选到稳定转染的细胞株,构建的稳定细胞系均能特异性的抑制Nrf2基因的表达.结论 通过RNA干扰(RNAInterfering,RNAi)技术能够成功构建BEAS-2B细胞Nrf2下调表达的细胞模型,为研究Nrt2在肺癌抗氧化通路中的作用机制奠定了基础.
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内容分析
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文献信息
篇名 Nrf2基因沉默的人支气管上皮细胞模型的建立
来源期刊 现代预防医学 学科 医学
关键词 RNA干扰 Nrf2基因 细胞模型
年,卷(期) 2017,(15) 所属期刊栏目 实验技术及其应用
研究方向 页码范围 2802-2807,2822
页数 7页 分类号 R113
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 冯斐斐 郑州大学公共卫生学院 32 179 8.0 12.0
2 吴拥军 郑州大学公共卫生学院 173 1075 16.0 23.0
3 倪静 泰山医学院公共卫生学院 2 0 0.0 0.0
4 玉崧成 郑州大学公共卫生学院 24 119 5.0 10.0
5 申培 泰山医学院公共卫生学院 1 0 0.0 0.0
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RNA干扰
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细胞模型
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研究去脉
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相关学者/机构
期刊影响力
现代预防医学
半月刊
1003-8507
51-1365/R
大16开
成都市人民南路三段17号
62-183
1975
chi
出版文献量(篇)
28356
总下载数(次)
56
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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