骆驼凝乳酶原基因在乳酸克鲁维酵母中的重组表达

• 作者: 任永成 刘思彤 徐龙龙 惠丰立
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 骆驼凝乳酶 乳酸克鲁维酵母 分泌表达
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 72-78
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2017.12.010

摘要

骆驼凝乳酶具有独特的凝乳特性,在干酪加工制作中具有潜在应用前景.为获得高活性的骆驼凝乳酶制剂,采用乳酸克鲁维酵母GG799为宿主,首次对经密码子优化的骆驼凝乳酶原(cPC)基因进行表达.将人工合成cPC基因插入乳酸克鲁维酵母表达载体pKLAC1,构建重组载体pKLAC l-cPC,并用电脉冲法将SacⅡ线性化的重组质粒转化到乳酸克鲁维酵母GG799中.通过含1％酪蛋白的YEPD平板活性筛选,全细胞PCR鉴定,最后获得一株多拷贝整合的基因工程菌cPC 1.该菌株可分泌表达cPC,经SDS-PAGE分析,重组cPC的分子质量约为41 ku,符合预期;酸化处理后cPC的分子质量约为36 ku,可正确自我剪切.摇瓶发酵培养120h,酶活最高达230 SU/mL.分别以牛乳、骆驼乳和牦牛乳作为底物检测酶活性,结果重组骆驼凝乳酶对3种动物乳均具有凝乳活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	惠丰立	南阳师范学院生命科学与技术学院	59	454	12.0	17.0
2	徐龙龙	南阳师范学院生命科学与技术学院	3	4	2.0	2.0
3	刘思彤	南阳师范学院生命科学与技术学院	2	2	1.0	1.0
4	任永成	南阳师范学院生命科学与技术学院	1	2	1.0	1.0