微紫青霉酸性木聚糖酶xynA基因的克隆与序列分析

• 作者: 侯洁 徐友强 李琴 李秀婷 熊科
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 微紫青霉 酸性木聚糖酶 基因克隆 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2017,（14）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 9-16
• 页数: 8页
• 分类号: Q71
• 字数: 5633字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201714002

摘要

基于酸性木聚糖酶在饲料及酿酒行业良好的应用前景,通过基因组步移的方法克隆得到微紫青霉酸性木聚糖酶的全长基因xynA,然后采取重叠延伸PCR技术进行内含子的切除获得ynA的cDNA序列,并对其进行了生物信息学分析.序列分析结果显示xynA基因全长720 bp,内含子63 bp,cDNA全长657bp.推测该木聚糖酶编码信号肽28个氨基酸,成熟肽190个氨基酸;预测该蛋白为分子质量20.61kD、等电点7.0的亲水性蛋白,且分子内不含二硫键.与其他真菌来源的GH11族耐酸性木聚糖酶进行序列比对,结果显示该酶的相应位置具有特征天冬氨酸残基Asp,且具有糖苷水解酶11族的保守区域特征以及典型的“右手半握”状结构,重组木聚糖酶基因xynA能够在大肠杆菌中成功表达,比酶活力达220.5U/mg.