利用CRISPR/Cas9系统构建绿色荧光转基因斑马鱼

• 作者: 刘斐斐 崔恒宓 杨哲 杨祎擎 田净净
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: CRISPR/Cas9系统 斑马鱼 绿色荧光蛋白 同源重组
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 基础兽医
• 页码范围: 83-86
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3119字
• 语种: 中文

摘要

斑马鱼是研究人类疾病的重要动物模型,基因组定点编辑技术在利用斑马鱼研究同源基因功能方面提供了简便高效的途径.利用CRISPR/Cas9系统,在斑马鱼TU品系第5号染色体中选择靶位点,将Cas9 mRNA、靶位点识别的sgRNA和带有同源重组臂、利用短链肌球蛋白(Mylz2)启动子启动的绿色荧光蛋白(eGFP)基因显微注射到斑马鱼受精卵中,获得在该位点定点插入外源基因,并在肌肉中特异表达绿色荧光蛋白的转基因斑马鱼.利用基因组DNA的PCR扩增,结合激发光下斑马鱼胚胎荧光表达情况,在存活的87尾幼鱼中发现其中45尾有荧光表达,同源重组率为51.724％.研究表明,利用CRISPR/Cas9系统成功定点插入外源基因,并获得在肌肉中特异性表达绿色荧光的斑马鱼.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔恒宓	扬州大学动物科学与技术学院	10	19	3.0	4.0
5	杨祎擎	扬州大学动物科学与技术学院	2	3	1.0	1.0
6	杨哲	扬州大学动物科学与技术学院	2	6	2.0	2.0
10	刘斐斐	扬州大学动物科学与技术学院	1	3	1.0	1.0
11	田净净	扬州大学动物科学与技术学院	1	3	1.0	1.0