脓毒症常见病原菌多重实时PCR检测方法的建立

• 作者: 卢金星 吴媛 李文革 杨海英 车洁 郑皓 陈小萍
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 脓毒症 肺炎克雷伯菌 大肠埃希菌 铜绿假单胞菌 鲍曼不动杆菌 凝固酶阴性葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 白假丝酵母菌 多重实时PCR
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 752-756
• 页数: 5页
• 分类号: R631
• 语种: 中文
• DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2017.09.012

摘要

目的 建立可同时检测脓毒症患者血液中肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和白假丝酵母菌的多重实时PCR方法.方法 根据各病原菌基因组保守序列设计引物和探针,建立多重实时PCR检测方法.对建立的多重实时PCR检测方法进行特异性、敏感性和灵敏度分析,并使用该法对112份脓毒症血培养阳性标本进行验证.结果 成功建立脓毒症常见病原菌的多重实时PCR检测方法.此方法特异性、敏感性良好,灵敏度达10-5 ng/μl,与标准检测方法(血培养加生化鉴定)相比,缩短了20 h.112份临床血培养阳性标本中,目标病原菌83例,多重实时PCR检出80例阳性;非目标病原菌29例,多重实时PCR检测均为阴性.检测结果显示,该方法特异性达100％,敏感性达96.39％.结论 该多重实时PCR检测方法具有快速、高效、灵敏、特异的优点,可用于临床重症监护室患者血液常见感染病原菌的诊断.