一种基于实时荧光定量PCR的寨卡病毒检测方法的建立

• 作者: 吕刚 吴悦 尹飞飞 崔秀吉 张优 朱奇轩 李奕基 梁培 王珊珊 符瑞佳 陈锦龙
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 寨卡病毒 Real?timePCR PCR
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 697-700
• 页数: 4页
• 分类号: R373.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2017.06.002

摘要

目的 建立一种基于实时荧光定量PCR技术的寨卡病毒检测方法.方法 根据代表性亚洲型、非洲型寨卡病毒株NS5基因序列,设计特异性引物ZK?1F/R、ZK?2F/R;利用PCR、Real?time PCR方法对引物特异性、灵敏度、可重复性进行评价和优化;利用寨卡病毒感染细胞对本方法进行验证.结果 PCR结果表明两对引物的特异性良好,其Real?time PCR检测灵敏度分别为1.0×103 copies/μL和1.0×101 copies/μL,扩增效率分别为0.68和0.90,说明引物ZK?2F/R的综合效果优于ZK?1F/R,通过优化实验条件建立基于引物ZK?2F/R的实时荧光定量PCR检测方法,对含有寨卡病毒PRVABC59株和MR766株的样本进行检测,结果分别为9.0×104 copies/μL、8.5×104 copies/μL.结论 本研究建立了一种检测寨卡病毒的方法,可用于临床患者ZIKV感染的检测和预防.