慢病毒介导沉默PD-L1基因在乳腺癌细胞中的表达

• 作者: 唐政山 唐泽民 孙园园 李放军 杨寅柯 欧阳婧
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 乳腺癌 细胞程序性死亡因子配体1基因 慢病毒载体 聚乙烯亚胺 共转染
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 259-266
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0181

摘要

构建含细胞程序性死亡因子配体1(PD-L1)基因的慢病毒载体三质粒体系,并检测其在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达情况.pMAGic 7.1慢病毒表达载体与质粒△8.91和pVSVG用聚乙烯亚胺(PEI)共转293T包装病毒,感染并筛选获得MDA-MB-231稳转细胞系,检测PD-L1表达情况.(1)MDA-MB-231在3种乳腺癌细胞中PD-L1表达量最高;(2)三质粒转染293T细胞48 h后荧光强度增强,达到90%以上;用病毒感染MDA-MB-231细胞,48 h获得20%左右荧光强度;(3)经筛选的MDA-MB-231稳转细胞系在mRNA水平和蛋白水平低表达PD-L1,其中由pMAGic-sh1包装的病毒干扰能力最强;(4)分别加入病毒后,干扰组细胞增殖能力下降,pMAGic-sh1干扰组细胞在加入病毒7 d后生长速度约为阴性对照的64.77%;(5)混合淋巴实验显示,sh-1干扰组的肿瘤抑制率为35.8%,是正常组的3.06倍,且干扰组的T淋巴细胞活性显著增强.成功通过PEI转染试剂建立了三质粒慢病毒包装体系,该体系获得的慢病毒可有效干扰乳腺癌MDA-MB-231细胞中PD-L1的表达量,所得的干扰细胞株细胞增殖能力下降,可增强T细胞增殖活性及肿瘤细胞杀伤活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李放军	湖南省人民医院社会医学部	12	38	3.0	6.0
2	唐泽民	湖南大学生物学院	3	1	1.0	1.0
3	孙园园	湖南大学生物学院	5	1	1.0	1.0
4	杨寅柯	湖南大学生物学院	7	1	1.0	1.0
5	唐政山	湖南大学生物学院	3	0	0.0	0.0
6	欧阳婧	湖南大学生物学院	3	1	1.0	1.0