线粒体自噬在百草枯中毒大鼠模型肺纤维化中的作用研究

• 作者: 刘开翔 占志朋 谢席胜
• 来源期刊: 川北医学院学报
• 关键词: 百草枯 肺纤维化 线粒体自噬 PINK1 Parkin 氧化应激
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 呼吸系统疾病研究专题(策划顾问 张龙举)
• 页码范围: 324-328
• 页数: 5页
• 分类号: R595.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-3697.2017.03.003

摘要

目的:建立百草枯(paraquat,PQ)中毒大鼠模型,观察不同阶段肺线粒体膜电位(JC-1染色)、调控线粒体自噬关键性蛋白PINK1、Parkin及活性氧(reactive oxygen species,ROS)的变化,探讨线粒体自噬是否参与PQ中毒肺纤维化的发生.方法:成年雄性SD大鼠42只,随机分为正常对照组(n=6)、模型组(n=36),模型组下设2 h、12 h、1 d、3 d、7 d和14 d共6个时间点,每个时间点各6只大鼠.使用20%PQ溶液50 mg/kg一次性灌胃大鼠建立PQ中毒模型.通过流式细胞仪检测血红细胞ROS浓度;HE染色和Masson染色观察PQ中毒后肺组织病理损害;JC-1染色检测肺组织线粒体膜电位变化;Western blot检测PINK1、Parkin蛋白变化.结果:与对照组相比,随着PQ中毒时间的延长,肺纤维化病理评分较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05);PQ组ROS荧光阳性强度率比值在中毒后2 h显著升高,中毒后12 h达高峰后逐渐下降(P<0.05),中毒后14 d与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);PQ组肺组织JC-1红绿荧光比均较对照组降低,Western blot提示随中毒时间延长,PINK1及Parkin蛋白表达均升高,差异有统计学意义(P<0.01).PQ组肺组织JC-1红绿荧光比与PINK1及Parkin、肺纤维化病理评分均呈负相关(r=-0.890,P<0.01;r=-0.845, P<0.01;r=-0.794,P<0.01).在PQ中毒12 h内,血红细胞ROS荧光强度阳性率与JC-1红绿荧光比呈负相关(r=-0.712,P<0.01),与PINK1及Parkin、肺纤维化病理评分呈正相关(r=0.571,P<0.01;r=0.484,P<0.01;r=0.602,P<0.05).结论:PQ中毒导致大鼠产生了明显氧化应激,诱发了线粒体自噬.ROS的产生与线粒体自噬的发生密切相关,共同参与了PQ大鼠肺纤维化的发生发展.