鼠李糖乳杆菌电转化条件的研究

• 作者: 北婷婷 张会彦 李晨 田洪涛 罗云波 谷新晰
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 鼠李糖乳杆菌 质粒pMG36e 电转化 电转化效率
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 65-71
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2017.04.009

摘要

目的:研究不同因素对鼠李糖乳杆菌电转化效率的影响,探讨电转化的最适条件,提高电转化效率.方法:以鼠李糖乳杆菌05-28为受体菌株,大肠杆菌-乳酸菌穿梭型质粒pMG36e为载体,通过原生质体电转化的方法研究了质粒浓度、电击缓冲液、电转化参数、复苏培养基组成及复苏培养时间对电转化效率的影响.结果:利用1 μL质量浓度为1μg/μL的质粒pMG36e,在电场强度8 kV/cm,电阻200 Ω,电容25 μF的条件下进行电击转化,以含有0.5 mol/L蔗糖和20 mmol/L的MgCl2、CaCl2且无吐温80的MRS再生培养基复苏培养2.5 h,并采用添加红霉素的筛选培养基,获得1.66×105 CFU/μg DNA的电转化效率.结论:实现了鼠李糖乳杆菌的高效遗传转化,为遗传育种提供了技术支持.