双重PCR检测奶牛隐性乳房炎大肠杆菌与无乳链球菌方法的建立及应用

• 作者: 付玉蓉 曾荣荣 瞿秋红 郝景锋
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 大肠杆菌 无乳链球菌 双重PCR 隐性乳房炎 奶牛
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 临床兽医
• 页码范围: 113-116
• 页数: 4页
• 分类号: S858.23
• 字数: 3313字
• 语种: 中文

摘要

为快速检测奶牛隐性乳房炎主要致病菌大肠杆菌和无乳链球菌,分别针对2种致病菌16S-23S rRNA和16S rRNA基因设计2对特异性引物,优化并确立双重PCR反应体系.特异性检测表明,对其他对照菌株未扩增出目的条带;敏感性试验表明,该双重PCR对大肠杆菌、无乳链球菌的最小检测浓度分别为102、103 cfu/mL.同时采用双重PCR与细菌学检查法对送检的96份奶样进行检测,结果双重PCR检出63份大肠杆菌阳性、54份链球菌阳性;细菌学方法检出29份大肠杆菌阳性、37份链球菌阳性.说明本研究建立的双重PCR方法敏感、快速,可用于检测大肠杆菌和无乳链球菌引起的奶牛隐性乳房炎.