产O-乙酰高丝氨酸的大肠杆菌构建与发酵测试

• 作者: 徐国栋 李庆刚 杨静 牟海津 郑小梅 郑平
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 大肠杆菌 O-乙酰高丝氨酸 天冬氨酸激酶I/高丝氨酸脱氢酶I 高丝氨酸乙酰基转移酶 发酵培养基优化
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 200-209
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0310

摘要

O-乙酰高丝氨酸(OAH)是具有潜在工业应用价值的前体化合物,可用于制备高丝氨酸与蛋氨酸等.以一株改造自苏氨酸产生菌的Escherichia coli ThrL为出发菌株,过表达OAH合成途径中的关键酶高丝氨酸脱氢酶基因thrA和高丝氨酸乙酰基转移酶基因metX,并利用不同强度的启动子组合优化这两个基因的表达水平,通过发酵培养基中的苏氨酸和酵母粉的浓度优化以提升OAH的产生菌株的生产性能.通过启动子组合优化结果发现,当thrA与metX均采用J23110启动子时,该重组菌株E.coli OAH4的OAH合成能力最强,摇瓶发酵50 h后,其OAH产量为1.54 g/L.当苏氨酸的浓度为2 g/L,酵母粉的浓度为6 g/L时,E.coli OAH4的发酵水平最高,摇瓶发酵50 h后,OAH的产量可进一步提升至1.98 g/L.本研究首次在E.coli中实现了OAH的合成,并通过发酵优化确定了OAH的最优发酵条件,为后续OAH生产应用研究奠定了基础.