[目的]建立一种快速、准确的鼠李糖乳杆菌检测方法.[方法]根据已报道的鼠李糖乳杆菌(Lactoba-cillus rhamnosus)的gyrB基因保守序列,设计用于检测鼠李糖乳杆菌的特异性DPO引物,结合SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR技术,建立鼠李糖乳杆菌的实时荧光PCR检测方法,评价其特异性和灵敏度,并将建立的检测方法用于实际样品的检测中.[结果]该方法对2株鼠李糖乳杆菌能得到阳性扩增,而其余10种乳酸菌及阴性对照没有扩增曲线,而且在退火温度为50~60℃不影响其特异性;该实时荧光PCR检测灵敏度比农业部标准中普通PCR检测高10倍;用10种微生物肥料及其它益生菌产品进行了验证,检出情况与产品标识一致.[结论]研究建立的SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR能够准确、高效的检测微生物肥料及其他益生菌产品中的鼠李糖乳杆菌.