抗苹果斑点落叶病基因Mal d1的克隆及功能鉴定

• 作者: 丛佩华 宗泽冉 张利义 张彩霞 田义 韩晓蕾
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 苹果 Mal d 1 表达分析 转基因 斑点落叶病菌
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 343-354
• 页数: 12页
• 分类号: S661.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0654

摘要

以苹果叶片总RNA为模板,通过克隆获得抗苹果斑点落叶病基因Mal d 1.Mal d 1开放阅读框长度为480 bp,编码159个氨基酸残基,包含2个外显子和1个内含子.蛋白结构分析显示,Mal d 1蛋白包含betv 1-like结构域.荧光定量PCR分析结果表明,Mal d 1 在苹果叶、花、果皮、果肉中均有表达,但各器官中表达水平存在差异;在不同发育时期的果皮中都有表达,表达水平随时间呈现先上升后下降的趋势;在抗性品种叶片中表达水平较高;在叶片人工接种病菌条件下表达量随时间的延长明显高于对照组.利用PRI101-AN载体和农杆菌介导的遗传转化方法转化苹果愈伤组织,转基因愈伤组织的抗病鉴定结果显示,Mal d 1过量表达增强愈伤组织对苹果斑点落叶病的抗性.