猪乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白的原核表达、纯化及活性检测

• 作者: 张二芹 张改平 滕蔓 罗俊 许倩茹 赵东 赵孟孟 邓瑞广
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 乙脑病毒 EDⅢ蛋白 表达蛋白
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 28-30
• 页数: 3页
• 分类号: S852.65+1
• 语种: 中文

摘要

在大肠杆菌BL21(DE3)中表达乙脑病毒(JEV) EDⅢ蛋白、镍柱纯化并检测表达蛋白.采用RT-PCR方法扩增EDⅢ基因片段,构建重组表达载体pET-28a-EDⅢ并转化到BL21(DE3)菌,经IPTG诱导蛋白表达,表达可溶性产物经Ni-NTA亲和层析纯化,最后通过SDS-PAGE和Western-Blot检测表达蛋白.结果成功构建原核表达载体pET-28a-EDⅢ;EDⅢ蛋白在BL21(DE3)菌已表达,经Ni-NTA获得纯化蛋白,并经Western-Blot检测具有反应活性.