血塞通调节miRNA-146影响内皮细胞凋亡的干预作用

• 作者: 刘咏梅 段练 滕菲 王阶 陈光
• 来源期刊: 中国实验方剂学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人脐静脉内皮细胞 血塞通 氧化损伤 细胞凋亡 微小RNA
• 年，卷（期）: 2017,（19）
• 所属期刊栏目: 冠心病病证结合分子生物研究专题
• 页码范围: 6-10
• 页数: 5页
• 分类号: R287|R259
• 语种: 中文
• DOI: 10.13422/j.cnki.syfjx.2017190006

摘要

目的:探讨血塞通(XST)对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)凋亡的影响及作用机制.方法:体外培养HUVEC,H2O2作为氧化剂作用于HUVEC制作氧化应激模型.通过血塞通干预,观察H2O2诱导的HUVEC细胞凋亡的变化,从表观遗传学微小RNA(microRNA,miRNA)角度探讨血塞通对HUVEC的保护作用及其作用机制.将体外培养的HUVEC分为空白组,H2O2模型组,H2O2模型+XST(30 mg·L-1,处理24 h)组.通过细胞计数试剂盒-8(CCK8)法检测细胞活力,Annexin V/碘化丙啶(PI)测定细胞凋亡,实时荧光定量核酸扩增检测系统(Real-time PCR detecting system,Real-time PCR)检测miRNA-146和miRNA-199表达水平.结果:HUVEC经过i00 μmol·L-1 H2O2处理之后,细胞晚期凋亡和早期凋亡都有明显升高(P＜0.05).用质量浓度从1 ～ 100 mg·L-1XST HUVEC细胞进行预处理后,发现用10 mg·L-1XST预处理可以明显地改善细胞增殖情况.Annexin V/PI双染细胞凋亡检测发现HUVEC经过100 μmol·L-1H2O2处理之后,细胞PI阳性率R3(晚期凋亡)和Annexin V阳性率R5(早期凋亡)都有明显升高(P＜0.05).H2O2模型经过30 mg·L-1XST处理之后,可以明显降低细胞PI阳性率R3(晚期凋亡)和Annexin V阳性率R5(早期凋亡)(P＜0.05).100 μmol-1·L-1H2O2处理可以明显升高hsa-miR-146b-5p和hsa-miR-199a-5p表达(P＜0.05).与单纯的H2O2处理比较,经过30 mg·L-1的血塞通处理之后,可以明显降低hsa-miR-146b-5p表达(P＜0.05).结论:血塞通可以明显抵抗H2O2诱导的HUVEC细胞氧化损伤,可能是通过抑制hsa-miR-146b-5p的升高发挥保护作用.