脂肪酶-P450脂肪酸脱羧酶融合蛋白催化的α烯烃合成

• 作者: 孙月 徐卉芳 李盛英 郑贤良 陈辉 马莉 齐凤霞
• 来源期刊: 科学通报
• 关键词: 脂肪酶 P450脂肪酸脱羧酶 融合蛋白 α烯烃 底物通道效应
• 年，卷（期）: 2017,（31）
• 所属期刊栏目: 专题:天然产物生物合成
• 页码范围: 3576-3582
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.1360/N972017-00212

摘要

α烯烃是一种独特的微生物天然产物.由P450脂肪酸脱羧酶催化的中长链(C12-C20)脂肪酸脱羧反应生成的α烯烃因其在生物燃料和生物材料领域的潜在应用前景备受关注.通过将脂肪酶T1L的甘油三酯水解活性与P450脱羧酶OleTJE的脂肪酸脱羧活性偶联,可将油脂原料两步转化为α烯烃.为了提高油脂到α烯烃的转化效率,并降低两种酶的分步制备成本,本研究通过20个氨基酸的linker序列将双酶共价连接形成重组融合蛋白N-His6-OleTJE-linker-T1L(FusC).在大肠杆菌中表达的FusC经镍柱层析纯化后成功实现双功能活性.经气相色谱分析,融合蛋白催化的甘油三酯顺序水解-脱羧偶联反应的产烃率达到31.7％,催化效率相对于双酶游离混合体系明显提升,展现出良好的底物通道效应,具有潜在的实际应用前景.