UPLC-MS/MS法同时测定人血浆和脑脊液中<em>3</em>种抗神经精神性狼疮药物的浓度

• 作者: 张奉春 江骥 王维聪 胡蓓 郑昕
• 来源期刊: 药物分析杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甲泼尼龙 环磷酰胺 甲胺喋呤 高效液相色谱-串联质谱法 神经精神性狼疮 脑脊液 血脑屏障穿透率
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 代谢分析
• 页码范围: 2068-2075
• 页数: 8页
• 分类号: R917
• 语种: 中文
• DOI: 10.16155/j.0254-1793.2017.11.24

摘要

目的:建立同时检测人血浆、脑脊液中甲泼尼龙(methylprednisolone,MP)、环磷酰胺(cyclophnosphamide,CP)和甲胺喋呤(methotrexate,MTX)的UPLC-MS/MS法,初步评价了3种药物在神经精神性狼疮(NPSLE)患者中的血脑屏障穿透率.方法:以4-氨基苯乙酮为内标物,对血浆及脑脊液样品进行蛋白沉淀处理后,采用UPLC-MS/MS法同时检测各物质.色谱条件:采用ACQUITY UPLC CSH色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm),以含0.1％甲酸的水溶液及含0.1％甲酸的乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1,柱温30℃;质谱条件:电喷雾离子源(ESI),正离子和负离子扫描,采用多反应监测(MRM)的质谱扫描方式进行测定.MP为负离子扫描(m/z 373.1→343.2);CP及MTX为正离子扫描(m/z261→233,m/z 455→308);内标4-氨基苯乙酮为正离子扫描(m/z 136.0→93.8).本实验考察了3个化合物血浆样品制备后自动进样器放置的稳定性和稀释可靠性;以及脑脊液样品室温放置、制备后自动进样器放置稳定性和稀释可靠性.结果:血浆中3种药物标准曲线浓度范围分别为MP 0.5～500 ng· mL-1,CP0.5～200 ng· mL-1,MTIX 0.5～500 ng· mL-1;脑脊液中3个药物标准曲线浓度范围均为0.5～200 ng·mL-1.血浆和脑脊液中化合物的批内、批间精密度(RSD)均＜15％,相对误差均在±15％范围内.基质效应、萃取回收率和稳定性也分别进行了验证.且样本储存和处理过程中,3个化合物能够保持稳定.本方法用于检测使用MP,CP和MTX治疗的NPSLE患者的血浆与相应时间的脑脊液样本,用于评价3种药物的血脑屏障穿透率.结论:本方法简便、灵敏、准确,适用于3种药物的血脑屏障穿透率研究,且在方法应用中验证了临床方案的合理性.