摘要:
目的 观察芹黄素联合缺血后处理方案对大鼠肾缺血再灌注损伤后肾小管上皮细胞株(NRK-52E)的TLR4/NF-κB表达的影响.方法 2016年7—11月于武汉大学消化系统疾病湖北省重点实验室进行实验.用大鼠NRK-52 E建立肾缺血再灌注损伤模型,分为5组:正常组(N组)、缺氧/复氧组(I/R组)、I/R+芹黄素组(Api组)、缺血后处理组(IPO组)、芹黄素+缺血后处理联合治疗组(Api+IPO组).CCK8染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡,试剂盒检测SOD和MDA含量,Real time PCR检测TLR4、NF-κB、TNF-α和IL-1β表达情况,Western blot检测TLR4和NF-κB表达水平.结果 与N组比较,I/R组细胞存活率明显下降(P<0.01).Api组、IPO组和Api+IPO组相对于I/R组细胞存活率显著上升,其中Api+IPO组存活率最高.与N组比较,I/R组细胞凋亡率增加(q=15.33,P<0.01);而与I/R组比较,Api组、IPO组和Api+IPO组凋亡率明显下降(q=7.46、8.92、14.06,P<0.01).与N组比较,I/R组SOD含量明显降低(q=7.60,P<0.01),MDA含量明显升高(q=-7.51,P<0.01);与I/R组比较,Api组、IPO组和Api+IPO组SOD含量显著增加(q=-3.49、-2.71、-4.97,P<0.05),MDA含量明显降低(q=2.95、2.29、4.07,P<0.05).与N组比较,I/R组TLR4、NF-κB、TNF-α和IL-1βmRNA表达明显上调(q=-7.74、-9.52、-10.88、-10.75,P<0.01);与I/R组比较,Api组、IPO组和Api+IPO组的TLR4、NF-κB、TNF-α和IL-1βmRNA表达明显下调(q=2.99、3.71、3.98、4.52;2.57、3.03、3.50、3.37;4.47、5.03、5.87、5.56,P<0.05).结论芹黄素和体外缺血后处理均能明显缓解肾缺血再灌注损伤,其中芹黄素和体外缺血后的联合治疗方案效果最明显,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路有关.