抗IL-4R单链抗体原核表达载体的构建与表达

• 作者: 何光志 刘茜明 刘莉莉 杨光勇 王文佳
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 受体,白细胞介素4 重组蛋白质类 电泳,聚丙烯酰氨凝胶 单链抗体 原核表达
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 897-901
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20170284

摘要

目的 通过BL21(DE3)原核表达系统制备抗白细胞介素-4受体(IL-4R)鼠抗人单链抗体(scFv).方法在前期研究结果的基础上优化抗IL-4R scFv序列,优化后分析scFv序列,构建重组质粒pET-32a-scFv,将该重组质粒酶切鉴定,将其转入BL21(DE3)原核表达菌进行诱导表达,并进行SDS-PAGE分析检测,对表达蛋白进行纯化和复性,通过SDS-PAGE分析抗IL-4R单链抗体的分子质量,运用Western blot检测融合蛋白的特异性.结果插入pET-32a载体的scFv序列长度761 bp,抗IL-4R单链抗体的分子质量在45 ku左右,重组蛋白具有较高的特异性.结论本实验成功构建pET32a-scFv原核表达系统,重组蛋白具有较高的免疫反应性,为进一步研究抗IL-4R单链抗体作为药物靶点提供了工作基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王文佳	贵阳中医学院基础医学院	73	342	10.0	16.0
2	何光志	贵阳中医学院基础医学院	65	154	7.0	10.0
3	杨光勇	贵阳中医学院基础医学院	18	37	4.0	6.0
4	刘茜明	贵阳中医学院基础医学院	14	18	3.0	4.0
5	刘莉莉	贵阳中医学院基础医学院	3	1	1.0	1.0