摘要:
目的 观察密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺细胞凋亡因子Bax、Bcl-2、Fas和FasL的影响,探讨密蒙花颗粒剂对去势雄兔干眼症模型的疗效.方法 将密蒙花原药材制备成颗粒剂.将30只健康成年新西兰长耳白兔(雄性),随机分为空白组(A组),模型组(B组),密蒙花颗粒剂组(C组),安慰剂组(D组),睾酮组(E组)5组,每组6只.除A组外其余4组实验用兔行双侧睾丸及附睾切除术.除A、B组外,从术后第3日开始C组予密蒙花颗粒剂,按100 mg/kg灌胃,3次/日;D组予生理盐水20 mL灌胃,3次/日;E 组按2 mg/kg在大腿肌肉处注射丙酸睾酮注射液,每3日注射1次.各组实验用兔,分别于术前和术后第4周各进行1次Schirmer Ⅰ试验(Schirmer Ⅰ test,SⅠT)和泪膜破裂时间(tear break-up time,BUT)测定.用药观察4周后采用空气栓塞法处死各组兔子,摘取双眼泪腺组织,采用免疫组化法对泪腺细胞凋亡因子Bax、Bcl-2、Fas和FasL的表达进行检测,并观察泪腺组织结构形态图.结果 (1)SⅠT及BUT结果:与本组术前及术后A组比较,B、D组SⅠT及BUT均明显下降(P<0.01);与B、D组术后比较,C、E组SⅠT及BUT升高,且差异均有统计学意义(P<0.01).(2)Bax、Bcl-2、Fas、FasL表达:与A组比较,B、D组Bax、Fas、FasL表达均明显增多,Bcl-2表达明显减少(P<0.01);与B、D组比较,C、E组Bax、Fas、FasL表达均明显减少,Bcl-2表达明显增多(P<0.01).(3) Bax、Bcl-2、Fas、FasL表达观察结果:A组:泪腺结构清晰,未见Bax、Bcl-2、Fas、FasL表达;B组:泪腺结构模糊,Bax、Fas、FasL均大量表达于细胞膜和细胞浆中,呈棕黄色颗粒,Bcl-2仅少量表达;C组:泪腺结构清晰,散见Bax、Fas、FasL表达,Bcl-2大量表达于细胞膜和细胞浆中,呈棕黄色颗粒;D组:泪腺结构模糊,Bax、Fas、FasL均大量表达于细胞膜和细胞浆中,呈棕黄色颗粒,Bcl-2仅少量表达;E组:泪腺结构清晰,散见Bax、Fas、FasL表达,Bcl-2未见表达.结论 密蒙花颗粒剂具有与雄激素相似的抑制泪腺细胞凋亡因子Bax、Fas和FasL表达,同时上调Bcl-2的作用,能抑制雄激素缺乏所致兔泪腺细胞的凋亡,维持泪腺基础分泌量,但其作用弱于雄激素.