嗜热子囊菌JCM12803的α-半乳糖苷酶基因tcgal27A在毕赤酵母中的表达

• 作者: 张多多 李中媛 罗会颖 罗学刚 郑菲
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 嗜热真菌 α-半乳糖苷酶 热稳定性 异源表达
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 207-213
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016-1083

摘要

从嗜热子囊菌(Thermoascus crustaceus)JCM12803克隆 α-半乳糖苷酶基因,并对其酶学性质进行系统的研究,旨为获得工业应用性质优良的 α-半乳糖苷酶.通过RT-PCR方法从T.crustaceus JCM12803中克隆 α-半乳糖苷酶基因序列,并对其酶学性质进行了系统的分析.结果显示,tcgal27A属于糖苷水解酶27家族,基因全长1918 bp,含有4个内含子,cDNA全长1419 bp,编码472个氨基酸,预测tcgal27A N端含有24个氨基酸为其可能的信号肽.将TCGal27A在毕赤酵母中成功地进行了表达,所获得的重组TCGal27A具有高比活(336.5 U/mg)及宽泛的底物特异性,对蜜二糖(14.4 U/mg)、棉子糖(9.1 U/mg)、角豆胶(3.6 U/mg)、魔芋粉(1.6 U/mg)、瓜尔豆胶(1.3 U/mg)、水苏糖(0.7 U/mg)都有着不同程度的降解作用.以pNPG为底物时的Km值为1.6 mol/mL,Vmax为536.8μmoL/(min·mg).TCGal27A的最适作用pH为4.5,最适温度为65℃,50℃处理1 h之后酶活力还能保持86.0%.这些结果表明耐高温TCGal27A性质优良,可添加到饲料中,在消化和提高豆粕蛋白能量利用率方面有良好的潜在应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗会颖	中国农业科学院饲料研究所	41	299	11.0	16.0
2	郑菲	中国农业科学院饲料研究所	2	30	1.0	2.0
6	张多多	工业发酵微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院	1	1	1.0	1.0
7	李中媛	工业发酵微生物教育部重点实验室天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院	1	1	1.0	1.0
8	罗学刚	工业发酵微生物教育部重点实验室 天津市工业微生物重点实验室 天津科技大学生物工程学院	1	1	1.0	1.0