表达PEDF的人胎盘间充质干细胞抑制人脐静脉内皮细胞增殖和迁移

• 作者: 冯刚 刘康 白亦光 肖东琴 陈巧玲
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 色素上皮衍生因子 胎盘间充质干细胞 人脐静脉内皮细胞 细胞增殖 细胞迁移
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 226-230
• 页数: 5页
• 分类号: R329
• 字数: 4015字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2017.03.006

摘要

目的 探讨携带色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)基因的腺病毒转染胎盘间充质干细胞(PMSCs)后对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的抑制作用. 方法 取足月产胎儿的胎盘组织,分离、培养PMSCs,用流式细胞术鉴定其表面标记.用携带PEDF基因的腺病毒(Ad-PEDF)转染PMSCs,并用Western blot和ELISA检测转染了Ad-PEDF的PMSCs细胞(PMSCs-PEDF)培养上清中PEDF的表达.MTT测定PMSCs-PEDF表达的PEDF对HUVECs增殖的影响.Transwell实验检测PMSCs-PEDF所表达的PEDF蛋白对HUVECs迁移的抑制作用. 结果 用流式细胞术对分离的PMSCs进行免疫表型分析,结果显示,CD44、CD73、CD90、CD105表达呈阳性,而CD34、CD45表达呈阴性.Western blot结果显示,重组腺病毒成功将PEDF基因传送至PMSCs细胞内并产生分泌性的PEDF蛋白.ELISA结果显示PMSCs-PEDF可并分泌高水平的PEDF至培养基中[(65.2±4.9)ng/ml].MTT结果显示,PMSCs-PEDF培养基上清在稀释比例为1∶2时对HUVECs抑制率为56.3％±8.7％,随着稀释比例的增加抑制率逐渐降低.而PMSCs及PMSCs-null的培养基上清则对HUVECs抑制作用很弱.Transwell实验结果显示,与PMSCs组(208.8±14.7)及PMSCs-null组(199.0±20.7)相比,PMSCs-PEDF组(79.4±14.5)可显著抑制HUVECs迁移(均P＜0.05). 结论 PMSCs-PEDF可在体外高效表达PEDF蛋白,并抑制HUVECs细胞的增殖和迁移.