重组扁豆过敏原Len c1表达纯化及免疫活性鉴定

• 作者: 何颖 及志恒 张俊艳 肖春梅 邹泽红 郑俊斌 陶爱林
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: rLen c 1 纯化 免疫活性 IgE
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1416-1419,1456
• 页数: 5页
• 分类号: R-33|R392.8
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2017.08.004

摘要

目的:纯化重组扁豆过敏原Len c 1 (rLen c 1)并进行免疫活性鉴定.方法:通过原核表达的方式生产r Lenc 1,然后采用亲和层析的方法纯化带有StrepⅡ标签的目的蛋白.将BALB/c小鼠随机分为对照组(注射生理盐水)和过敏原致敏组(注射rLen c 1),通过腹腔注射方式免疫小鼠,建立BALB/c小鼠扁豆致敏模型,利用间接ELISA法检测血清总IgE和过敏原特异性IgE,鉴定重组扁豆过敏原的免疫活性.结果:IPTG成功诱导Lenc 1蛋白表达,rLen c 1蛋白主要以包涵体形式表达,通过透析复性和亲和层析获得纯化的复性扁豆过敏原蛋白rLen c 1,成功建立小鼠致敏模型.和对照组相比,致敏组小鼠TIgE及过敏原特异性IgE水平均明显增高,结论:获得纯化的具有免疫活性的rLen c 1过敏原蛋白,为扁豆过敏机制研究、单克隆抗体的制备、以及临床诊断和免疫治疗奠定基础.