DNA载体介导的小干扰RNA Tet-on基因表达系统的调控效应检测

• 作者: 周玉冰 安琪 张晓坚 李峰 李朵璐 段震峰 阚全程 韩超
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小分子干扰RNA 四环素调控系统 DNA载体 基因调控
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究·论著
• 页码范围: 30-35
• 页数: 6页
• 分类号: R733
• 字数: 4385字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2017.07.007

摘要

目的 观察构建的DNA载体介导的小干扰RNA Tet-on基因表达系统的调控效应.方法 构建DNA载体介导的小干扰RNA(siRNA)Tet-on表达载体,pDIRS4.1 siRNA.以增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因和白细胞介素6(IL-6)基因为目的基因,应用脂质体介导的瞬时转染方法,分别将pDIRS4.1/EGFP siRNA载体和pEGFP-N3质粒、pDIRS4.1IL-6 siRNA载体和pIRESIL-6质粒共转染人成骨肉瘤细胞,加入系列浓度的四环素(Dox)后,观察其诱导效应.结果 pDIRS4.1 siRNA在人成骨肉瘤细胞中能够高效转染;随着Dox浓度升高,pDIRS4.1 siRNA载体在人成骨肉瘤细胞中对目的基因的沉默作用有较好的调控性,且目的基因的表达与Dox具有严格的剂量依赖关系,高浓度Dox时,IL-6表达水平降低约12倍.结论 该研究构建的以DNA载体介导的能够高效调控siRNA沉默基因效应的Tet-On基因表达系统,能够促进其在更多模型系统中进行基因功能研究的应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李峰	郑州大学第一附属医院药学部	142	753	13.0	19.0
2	张晓坚	郑州大学第一附属医院药学部	108	429	11.0	16.0
3	周玉冰	郑州大学第一附属医院药学部	18	42	3.0	5.0
4	李朵璐	郑州大学第一附属医院药学部	29	79	4.0	8.0
5	安琪	郑州大学第一附属医院药学部	24	77	6.0	7.0
6	韩超	郑州大学第一附属医院药学部	16	58	4.0	7.0
7	段震峰	郑州大学第一附属医院药学部	2	2	1.0	1.0
8	阚全程		1	2	1.0	1.0