变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸激酶基因的克隆、表达及生物信息学分析

• 作者: 何小用 余泗莲 孙文敬 崔凤杰 王大明 钱静亚 齐向辉
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 变形假单胞菌 2-酮基葡萄糖酸激酶 kguK基因 克隆 表达 生物信息学
• 年，卷（期）: 2017,（16）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 10-16
• 页数: 7页
• 分类号: Q781
• 字数: 5753字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201716002

摘要

采用聚合酶链式反应技术,从2-酮基葡萄糖酸工业生产菌株变形假单胞菌JUIM01中克隆2-酮基葡萄糖酸激酶的全长基因kguK,并在此基础上构建了重组菌株大肠杆菌BL21 (DE3) /pET-28a(+)-kguK.在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷的诱导下,该重组菌株表达了-个特异的分子质量约为36.0 ku融合蛋白,且该蛋白的Western-Blot鉴定结果显示为阳性.生物信息学分析结果表明,该蛋白是一种由305个氨基酸残基组成的亲水性蛋白,定位于细胞质中,存在着与pfkB家族蛋白类似的保守结构域,其二级结构中α-螺旋、延伸链和无规则卷曲所占的比例分别为35.73％、12.79％和51.48％.