二月兰SSR-PCR反应体系的优化及引物筛选

• 作者: 孙晓波 梁丽建 苏家乐 贾新平 邓衍明
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 二月兰 SSR-PCR 反应体系 引物筛选
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 林学·园艺·园林
• 页码范围: 40-46
• 页数: 7页
• 分类号: S681.9
• 字数: 4737字
• 语种: 中文

摘要

为建立适合二月兰的SSR-PCR反应体系,采用正交试验设计方法对影响二月兰SSR反应体系的5个因素(DNA模板、Mg2+、dNTPs、引物和Taq聚合酶)进行优化试验,筛选出每个因素的最佳水平.结果表明,10 μL反应体系中,Mg2+浓度2.0 mmol/L,dNTPs浓度0.4 mmol/L,引物浓度0.6 μmol/L,DNA模板量20 ng,Taq聚合酶量0.6U.以3份二月兰基因组DNA为模板,利用优化后的SSR-PCR反应体系进行引物筛选,从50对SSR引物中成功筛选出扩增条带清晰、具有多态性的引物有12对,证明该反应体系具有较好的稳定性和通用性.研究建立和优化的二月兰SSR-PCR反应体系,为进一步利用SSR标记技术开展二月兰分子生物学研究提供了理论依据和技术参考.