MBP-mCTCF融合蛋白原核表达载体的构建及表达

• 作者: 尚丽平 李武峰
• 来源期刊: 山西农业科学
• 关键词: CTCF 质粒构建 原核诱导表达
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 677-679,688
• 页数: 4页
• 分类号: Q51
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2481.2017.05.01

摘要

为了构建鼠的CTCF与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合蛋白的原核表达载体,并进行原核诱导表达及鉴定,以pMXs-3Flag-mCTCF为模板,PCR扩增得到mCTCF序列,目的基因片段EcoR Ⅰ,SalⅠ双酶切后连接到同样双酶切的pMal-C2G载体上,测序鉴定.将测序正确的质粒转化到E.coli BL21中,用IPTG诱导融合蛋白的表达,用SDS-PAGE分离检测蛋白表达效果.经菌液PCR、测序鉴定、双酶切鉴定证明,得到的重组质粒pMal-C2G-mCTCF构建成功,且成功诱导出了MBP-mCTCF融合蛋白,最佳诱导条件为:10×10-4 mol/L IPTG浓度在37℃诱导6h.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李武峰	山西农业大学生命科学学院	20	228	7.0	15.0
2	尚丽平	山西农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0