柚皮素通过环核苷酸通路拮抗血小板聚集的体外研究

• 作者: 吴焕林 徐丹苹 黄曼婷
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 柚皮素 血小板聚集 环磷酸腺苷 环磷酸鸟苷 磷酸二酯酶 血管扩张刺激磷蛋白
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1306-1312
• 页数: 7页
• 分类号: R285.5|R363.2+1
• 字数: 5437字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2017.07.025

摘要

目的: 探讨柚皮素拮抗二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集的作用机制.方法: 采用ELISA检测柚皮素对ADP诱导的大鼠血小板内环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)水平的影响.采用高效液相法检测柚皮素对血小板磷酸二酯酶(PDE)活性影响.采用Western blot检测柚皮素对ADP刺激的血小板内血管扩张刺激磷蛋白(VASP)磷酸化形式p-VASP(Ser157)、p-VASP(Ser239)的蛋白水平的影响.分别给予蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89、蛋白激酶G(PKG)抑制剂Rp-8-Br-PET-cGMPS和蛋白激酶C(PKC)抑制剂GF109203X预先孵育血小板后,再用柚皮素处理,然后给予ADP刺激,Western blot检测p-VASP(Ser239)蛋白水平.采用血小板聚集仪进一步观察PKA抑制剂、PKG抑制剂预先孵育血小板是否影响柚皮素对ADP诱导血小板聚集的抑制作用.结果: 柚皮素剂量依赖性地升高ADP抑制的血小板内cGMP水平,而并不改变cAMP水平.柚皮素还能显著升高血小板PDE活性.Western blot结果显示,柚皮素可明显升高由ADP抑制的p-VASP(Ser239)水平,但不影响p-VASP(Ser157)的蛋白水平,预先孵育PKG或PKC抑制剂并不影响柚皮素对p-VASP(Ser239)蛋白表达的作用,而预先孵育PKA抑制剂后,则能抑制柚皮素对p-VASP(Ser239)蛋白表达的作用.PKA抑制剂能阻断柚皮素对血小板聚集的拮抗作用,而PKG抑制剂并不影响其作用.结论: 柚皮素可能通过升高血小板内cGMP水平和激活PKA依赖的信号通路来介导VASP的磷酸化,从而发挥抗血小板聚集的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴焕林		122	1866	25.0	40.0
2	徐丹苹		23	98	6.0	9.0
3	黄曼婷	广州中医药大学第二临床医学院	7	23	3.0	4.0