沉默微小RNA-218表达保护STZ诱导的糖尿病大鼠肾组织

• 作者: 慕婷 李苏童 杨海波 王清俊 陈小琳
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA-218 慢病毒载体 糖尿病 肾脏
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1251-1257
• 页数: 7页
• 分类号: R587.2|R363.2
• 字数: 4500字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2017.07.016

摘要

目的: 探讨沉默微小RNA-218(microRNA-218, miR-218)表达对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病肾病大鼠肾脏组织的保护作用及其可能机制.方法: 采用单次腹腔注射STZ (50 mg/kg)方法制备糖尿病大鼠模型并构建miR-218短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体.SD大鼠被随机分为健康对照组、糖尿病模型组、空载慢病毒组及miR-218-shRNA组.于自动生化仪上检测不同时点(4、8和12周)大鼠血糖、24 h尿蛋白量、血清肌酐(serum creatinine,SCr)及血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)含量.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肾脏组织miR-218的表达.RT-qPCR和Western blot检测血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、肾病蛋白(nephrin)和p38丝裂原激活的蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase, p38 MAPK)的mRNA及蛋白表达水平.Caspase-3活性检测试剂盒检测caspase-3活性.末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法检测肾脏组织细胞凋亡.结果: 与健康对照组相比,STZ处理后大鼠miR-218表达水平显著升高.同时模型大鼠的血糖、24 h尿蛋白量、SCr及BUN含量显著升高(P<0.05);模型大鼠肾脏组织中HO-1和nephrin的mRNA和蛋白表达水平显著降低,而p38 MAPK蛋白的磷酸化水平显著升高;另外,模型大鼠肾脏组织中的caspase-3活性也显著升高.模型大鼠感染miR-218-shRNA后,miR-218表达水平显著下降并可以显著逆转上述效应.miR-218-shRNA组肾脏组织细胞的凋亡水平显著低于糖尿病模型组及空载慢病毒组.结论: miR-218参与了糖尿病大鼠的肾脏损伤,慢病毒载体沉默其表达能有效抑制肾脏组织细胞的凋亡,提示miR-218可以作为糖尿病肾病的基因治疗靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈小琳	西安市中心医院肾脏内科	3	5	1.0	2.0
2	慕婷	西安市中心医院肾脏内科	5	10	2.0	2.0
3	杨海波	西安市中心医院肾脏内科	5	21	3.0	4.0
4	李苏童	西安市中心医院肾脏内科	15	47	4.0	6.0
5	王清俊	铜川矿务局中心医院肾脏内科	4	7	2.0	2.0