禽腺病毒4型鞭毛重组蛋白的原核表达及其免疫效果研究

• 作者: 侯磊 全荣 刘爵 刘超 姜海军 朱珊珊 李子璇 王丹 王利佳 王菁 韦莉 齐宾宾
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 禽腺病毒4型 鞭毛基因 fiber2基因 原核表达 免疫保护
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

为研究禽腺病毒4型重组鞭毛-fiber2蛋白免疫保护性,将鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白基因与禽腺病毒4型的fiber2基因融合,再将融合基因和单独的fiber2基因分别克隆到原核表达载体pET-28a,后将构建的pET-28a-flagellin-fiber2和pET-28a-fiber2重组载体分别转入大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE和Western Blot鉴定表达产物,再将表达产物纯化后免疫21日龄SPF鸡;结果表明,重组菌在37℃培养条件下1.0 mmol/L的IPTG诱导6h可表达最多的可溶性重组蛋白,Western Blot分析表明,所表达的重组蛋白均能与禽腺病毒血清4型感染阳性血清发生特异性反应,说明所表达蛋白具有良好反应原性,动物试验表明,表达的两种目的蛋白能为鸡提供一定保护力,且低剂量的重组鞭毛-fiber2蛋白产生较好的免疫保护效果.