尿刊酸修饰壳聚糖载体负载中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白干扰RNA对结肠癌细胞增殖和迁移及凋亡的实验研究

• 作者: 张秀峰 张莹 徐侃 李美芽 杨关根 武文静 沈忠 潘洁莉 王厚东 裘建明
• 来源期刊: 中华胃肠外科杂志
• 关键词: 结直肠肿瘤 中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白 壳聚糖 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 694-700
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0274.2017.06.021

摘要

目的 探讨尿刊酸修饰壳聚糖(UAC)负载siRNA对中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)的基因沉默作用及对结肠癌细胞增殖、 迁移和凋亡的影响.方法 采用UAC和壳聚糖(CTS)分别包裹NGAL siRNA转染结肠癌细胞株HT-29,采用实时荧光定量PCR检测NGAL的表达量,并分析NGAL基因沉默与细胞增殖、 迁移及凋亡的关系.结果 荧光显微镜下显示,UAC-siRNA的转染效率为(37.52±7.17)%,高于CTS-siRNA的(11.32±3.39)%,差异有统计学意义(t=6.102,P=0.005).siRNA转染48 h后,以GAPDH为内参,测得UAC组NGAL基因的相对表达量为0.350,CTS组NGAL基因的相对表达量为0.529,差异有统计学意义(t=-3.743,P=0.02).增殖实验显示,UAC和CTS两组与对照组相比,细胞增殖率稍有下降,但差异无统计学意义(F=9.520,P=0.438).而迁移实验显示,UAC组和CTS组HT29细胞的24 h迁移率均低于对照组(F=6.756,P=0.029);其中UAC组HT29细胞的24 h迁移率为(77.90±7.14)%,低于CTS组的(87.67±3.98)%(t=-1.704,P=0.164).凋亡检测显示,转染后2 d,UAC组细胞凋亡率为(15.800±1.054)%,高于CTS组的(12.900±0.656)%和对照组的(11.933±1.914)%,差异有统计学意义(F=7.004,P=0.027).结论 CTS经尿刊酸修饰为UAC后,包裹能力及转染效率显著增加;以UAC为载体的siRNA干扰NGAL基因后,可沉默HT29结肠癌细胞株NGAL基因的表达,抑制HT29结肠癌细胞迁移,促进细胞凋亡.