摘要:
目的 研究注射用丹参多酚酸对缺氧缺血的小鼠脑胶质细胞(C8-D1A)神经营养因子合成分泌和转录的影响,及丹参多酚酸处理缺氧缺血胶质细胞条件培养液对缺氧神经元细胞Neuro-2A的保护作用.方法 胶质细胞分为对照组、模型组、0.1,1,10,50 μg·mL-1丹参多酚酸组、丹参多酚酸B、丹参多酚酸D组.对照组用高糖缓冲液,正常培养4h后换无血清全培养基;模型组用无糖缓冲液,放入缺氧小室,之后放入37℃孵箱中培养4h后加入无血清全培养基;丹参多酚酸组、丹参多酚酸B、丹参多酚酸D组在模型组缺氧缺糖4h后,加入含0.1,1,10,50 μg·mL-1丹参多酚酸及丹参多酚酸B、丹参多酚酸D的无血清全培养基.24 h后用细胞计数(CCK-8)法检测细胞活力,用酶联免疫吸附及聚合酶链式反应法检测胶质细胞脑源性神经营养因子、胶质细胞源性神经营养因子合成分泌及转录.Neuro-2A细胞的对照组,模型组及加药组的处理同氧糖剥夺胶质细胞,在4h后对照组更换为胶质细胞对照组上清,模型组更换为胶质细胞模型组上清,加药组更换为胶质细胞的加药组上清,24h后用CCK-8检测Neuro-2A细胞活力.结果 CCK-8法结果,对照组细胞活力为1.00 ±0.08,0.1,1,10,50 μg·mL-1丹参多酚酸组分别为1.04 ±0.09,1.05±0.09,1.03±0.07,1.02 ±0.06,对胶质细胞无细胞毒作用,且丹参多酚酸B组为1.05 ±0.14,能显著促进细胞增殖.丹参多酚酸对C8-D1A细胞神经营养因子合成分泌及转录均有促进作用,但无统计学意义(P>0.05).与对照组相比(0.57 ±0.05),模型组条件培养液显著降低缺氧神经元的细胞活力,对神经元没有保护作用.而丹参多酚酸在10 μg·mL-1时的细胞活力(0.85±0.02)较模型组(0.49±0.40)显著提高(P<0.05).结论 丹参多酚酸条件培养液对神经元有一定的保护作用.