阪崎克罗诺杆菌单克隆抗体的制备及其间接竞争-ELISA检测方法

• 作者: 丁承超 刘武康 刘箐 曾海娟 李杰 王广彬 王淑娟 翟绪昭 董庆利 谢曼曼
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 阪崎克罗诺杆菌 单克隆抗体 间接竞争ELISA
• 年，卷（期）: 2017,（20）
• 所属期刊栏目: 安全检测
• 页码范围: 268-272
• 页数: 5页
• 分类号: TS207.4
• 字数: 4268字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201720039

摘要

以阪崎克罗诺杆菌标准菌株ATCC 29004免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,经过两次细胞融合共制备出7株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1E9、2A7、2D10、3E5、5B10、6E3、12A2).其中2A7、2D10、3E5、12A2的效价达到了1∶256 000,6E3的效价为1∶128 000,5B10的效价为1∶64 000,1E9的效价为1∶32 000.亚型鉴定结果显示1E9的亚型为IgG1,6E3的亚型为IgG2b,其余抗体2A7、2D10、3E5、5B10、12A2的亚型均为IgG2a.对7株抗体进行特异性检测结果显示,2A7能与3株阪崎克罗诺杆菌(ATCC 29004、ATCC 29544、ATCC 12868)都结合,1E9能与其中两株(ATCC 29004、ATCC 12868)结合,且与其他11株类似菌和常见致病菌交叉反应结果显示7个抗体均有良好的特异性.用2A7建立的间接竞争酶联免疫吸附测定法对阪崎克罗诺杆菌的检测灵敏度可达到106 CFU/mL.