木聚糖酶XynGl-1在毕赤酵母中的表达及发酵条件优化

• 作者: 刘逸寒 宋诙 彭梦 徐健勇 王停停 路福平 郑宏臣
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 毕赤酵母 木聚糖酶 响应面 发酵优化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 37-43
• 页数: 7页
• 字数: 4533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201701007

摘要

将来源于Paenibacillus campinasensis GI-1的木聚糖酶编码基因成功整合到毕赤酵母GS115基因组上,构建了高产木聚糖酶XynG1-1的毕赤酵母工程菌.采用响应面法对该工程菌的发酵条件进行优化.首先使用Design-Expert软件进行Plackett Burman实验设计筛选出影响产酶量的3个主要因素,即甲醇含量、生物素含量和培养时间.在此基础上使用Design-Expert软件进行Box-Behnken实验设计,通过响应面分析得出优化的发酵培养条件为:甲醇含量2.28％,培养时间37.29 h,生物素4 mg/L,酵母粉20 g/L,蛋白胨20 g/L,YNB 30 g/L,装液量100 mL/L,转速250 r/min、温度28℃、磷酸缓冲液pH6.0.经实验验证,优化后的培养条件下胞外重组酶活达到707.2 IU/mL,与响应面预测结果一致,较优化前木聚糖酶酶活提高了7.9倍,较原始菌株产酶量提高了19.8倍.经10 L发酵罐扩大培养之后,重组木聚糖酶的酶活达到2 703 IU/mL.因此,该研究有效提高了木聚糖酶XynG1-1的发酵产量,并且,该重组酶保持了良好的酶学性质,可为工业化生产及应用奠定基础.