乙型肝炎患者治疗前后外周血CD4+ CD25+ Tregs TCR CDR3谱系漂移特征分析

• 作者: 吕红 姚新生 庄勤建 潘宗琴 邱隆敏
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢性乙型肝炎 急性乙型肝炎 T淋巴细胞受体 互补决定区3 调节性T细胞 恩替卡韦
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 临床免疫学
• 页码范围: 889-894,899
• 页数: 7页
• 分类号: R392-33
• 字数: 4122字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2017.06.017

摘要

目的:探讨AHB患者急性期及恢复期、CHB患者恩替卡韦治疗前后外周血PBMC中CD4+ CD25+Tregs TCRCDR3谱系漂移特征的变化.方法:采集4例正常人、3例AHB患者(急性期和恢复期)及4例CHB患者恩替卡韦治疗前后外周抗凝静脉血,分离外周血PBMC;磁珠分选法分选CD4+ CD25+ Tregs,提取总RNA,逆转录合成cDNA;根据TCR β链24个可变区基因(TRBV)家族设计相应的上游引物,并在β链恒定区(BC)设计一条共用的FAM荧光标记下游引物及对照引物.PCR扩增出24个包含完整CDR3区的TRBV家族的PCR产物,电泳鉴定目的片段;PCR产物送上海基康用毛细管电泳法进行基因扫描;用Peak Scanner Software v1.0软件分析研究对象TRBV家族CDR3谱系特征;采用配对t检验(paired-sample t test)检测AHB患者急性期及恢复期、CHB患者恩替卡韦治疗前后TRBV家族谱系漂移率差异.结果:3例AHB患者急性期呈现普遍谱系漂移的TRBV4、10、14、16、19家族在恢复期多转变为正态的多峰谱型,AHB患者恢复期外周血CD4+ CD25+ Tregs TRBV家族CDR3谱型漂移率显著低于急性期(t=9.456,P=0.011);TRBV8、11、13.2、15、16、18、20在3例CHB患者抗HBV治疗前出现克隆增生,TRBV1、5.2、6、12、14、24在3例CHB患者抗HBV治疗后出现克隆增生.CHB患者抗病毒治疗后TRBV家族CDR3谱型漂移率高于治疗前(t=-0.666,P=0.553).结论:AHB患者急性期呈现谱系漂移的TRBV4、10、14、16、19家族在恢复期多转变为正态的多峰谱型,推测这种转变可能与HBsAg、HBeAg转阴相关.CHB患者在治疗前TRBV8、11、13.2、15、16、18、20家族克隆增生的Tregs可能通过下调机体的细胞免疫应答,阻碍病毒清除;随着药物导致病毒载量的显著下降,TRBV1、5.2、6、12、14、24家族克隆增生的Tregs可能更有助于诱导机体出现免疫耐受,导致HBV不能彻底清除.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚新生	遵义医学院免疫学教研室	76	410	12.0	17.0
2	邱隆敏	遵义医学院附属医院感染科	48	288	10.0	14.0
3	庄勤建	遵义医学院附属医院感染科	6	30	3.0	5.0
4	吕红	遵义医学院附属医院感染科	9	54	4.0	7.0
5	潘宗琴	遵义医学院附属医院感染科	7	50	4.0	7.0