DENV-2感染的HUVECs与CD4+ T细胞相互作用对炎性细胞因子产生的影响

• 作者: 左丽 张妮 王克 袁静
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 登革病毒 人脐静脉内皮细胞 CD4+ T细胞 细胞因子 免疫调节
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 811-817
• 页数: 7页
• 分类号: R392.11
• 字数: 5243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2017.06.002

摘要

目的:研究原代人脐静脉内皮细胞(Primary human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)被登革Ⅱ型病毒(DENV-2)感染,与CD4+ T细胞共培养后,对产生主要炎性细胞因子的相互影响.方法:密度梯度离心法提取浓缩白细胞中的PBMC,免疫磁珠法阴性分选CD4+ T细胞,流式检测细胞表面CD3,CD4分子的表达和CD4+ T细胞的纯度.HUVECs经S1P1特异性受体激动剂CYM-5442预处理24h,加入103TCID50的DENV-2感染后,与CD4+ T细胞共培养,Real-time RT-PCR动态检测DENV-2感染HUVECs后病毒NS1基因及IL-6、IL-8的mRNA和CD4+ T细胞内IL-4、IL-17、TNF-α、IFN-y的mRNA相对表达量;双抗体夹心ELISA法检测培养上清IL-6、IL-8的表达.结果:流式检测经免疫磁珠阴选的CD4+ T细胞纯度为(98.02±0.32)％.DENV-2感染HUVECs后病毒NS1基因相对表达逐渐增加,在24 h(3.03±0.26,P＜0.001)达到峰值后下降,而感染DENV-2后与CD4+ T细胞共培养组的NS1基因相对表达量低于感染组,且呈下降趋势.感染后IL-6和IL-8表达均有上调,与CD4+ T细胞共培养后,IL-6和IL-8在各时间点表达均明显升高(P＜0.01).CYM-5442预处理的共培养感染组中,IL-6在24 h(28.91 ±2.34,P＜0.05)、36 h(19.36±0.1,P＜0.05)和72 h(13.84±0.82,P＜0.05)显著下降,IL-8表达显著下降.与感染后的HUVECs共培养后CD4+ T细胞的IL-4、IL-17、TNF-α、IFN-γ的mRNA表达均明显升高.结论:DENV-2能感染原代HUVECs;与CD4+ T细胞共培养后NS1的表达被抑制.CD4+ T细胞不仅能增强被DENV-2感染的HUVECs的活化,同时也能被感染后的HUVECs活化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	左丽	贵州医科大学免疫学教研室	23	43	4.0	5.0
2	袁静	贵州医科大学免疫学教研室	8	14	2.0	3.0
3	张妮	贵州医科大学免疫学教研室	5	7	2.0	2.0
4	王克	贵州医科大学免疫学教研室	3	7	2.0	2.0