荧光定量PCR法计数农家干酪中动物双歧杆菌乳酸亚种

• 作者: 丁琳 侯惠玲 关宏 刘宇超 刘振艳 刘韩 杨文钦 臧传刚 裴芳艺 郭皓 陈雪
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 荧光定量PCR 干酪 双歧杆菌
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 生产与科研经验
• 页码范围: 117-123
• 页数: 7页
• 字数: 5650字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.014556

摘要

分别利用荧光定量PCR及平板菌落计数法计数农家干酪中双歧杆菌的菌体数,通过对结果的比较分析,建立一种适用于快速、敏感、特异的检测干酪中双歧杆菌活菌数的方法.利用传统工艺制备双歧杆菌农家干酪,在其贮存期间分别采用荧光定量PCR及平板菌落计数法计数干酪中双歧杆菌的数量.其中,在利用荧光定量PCR法检测时,对影响PCR定量准确的因素进行系统研究,包括设计双歧杆菌引物,并对引物特异性进行评价、考察,从干酪基质中提取DNA的数量和质量,建立标准曲线.引物特异性验证结果表明,引物专一性强.采用试剂盒法从干酪样品中提取DNA的纯度较好,OD260/OD2s0均在1.75 ～ 1.82之间.除贮存第1天外,荧光定量PCR法计数结果比平板计数法高0.39％～2.25％,未见显著差异.荧光定量PCR具有灵敏、特异、简便和快速的特点,可用于干酪中双歧杆菌的定量检测.