人胚胎干细胞源多巴胺能神经元的功能性分化

• 作者: 彭雅南 李科 杨柳 王埮 胡兰 赵振强 陈丽 陈小武 陈志斌
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 人胚胎干细胞 细胞分化 多巴胺能神经元 帕金森病 膜片钳 细胞电生理 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2017,（33）
• 所属期刊栏目: 胚胎干细胞
• 页码范围: 5360-5368
• 页数: 9页
• 分类号: R394.2
• 字数: 10037字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.33.018

摘要

背景:干细胞源多巴胺能神经元作为帕金森病替代疗法的细胞来源,其体外分化方案被不断的优化和改良,后续的鉴定手段和检测指标也随之不断完善.目的:通过观察人胚胎干细胞分化为多巴胺能神经元的形态发育过程,检测其电生理特性,以了解在目前分化方案下人胚胎干细胞能否发育为形态成熟、功能成熟的多巴胺能神经元.方法:通过单层贴壁法,采用SMAD通道双抑制剂分化方案,定向诱导人胚胎干细胞分化为多巴胺能神经元,通过光镜、电镜和细胞免疫荧光等检测手段进行形态学和免疫化学鉴定,并应用膜片钳技术检测多巴胺能神经元的电生理特性.参照体内多巴胺能神经元的电生理标准,对体外分化的多巴胺能神经元进行功能评价.结果与结论:①采用SMAD通道双抑制剂分化方案,成功诱导人胚胎干细胞定向分化为形态学上发育成熟的多巴胺能神经元;②膜片钳检测结果显示多巴胺能神经元具有成熟的电生理功能,且其电生理特性符合体内多巴胺能神经元的评价标准;③上述分化方案可以将人胚胎干细胞定向分化为成熟的、有功能的多巴胺能神经元.